Açilkarnitinler, amino ve yağ asitlerinin parçalanmasından türetilen L-karnitin’in asetillenmiş formlarıdır. Açilkarnitin analizi, mitokondriyal yağ asidi β-oksidasyonu ve organik asit metabolizması bozukluklarının biyokimyasal tespiti için yapılır. Açilkarnitin analizi ile ortaya çıkan koşullar, ortak olarak, farklı hücre içi bölmelerde ifade edilen birkaç karnitin açil-CoA transferazından biri için substratlar olan kısa, orta ve/ veya uzun zincirli açil-CoA türlerinin birikimine sahiptir.
Son zamanlarda, açilkarnitin formlarını ölçmek için bir sıvı kromatografik (LC) ayırma adımını içeren MS/MS yöntemlerine olan yönelim artmaktadır. Jasem Kantitatif Karnitin/Açilkarnitin LC-MS/MS Analiz Kiti karnitin/açilkarnitinlerin kantitatif analizinin yanı sıra total C0’ın kantitatif analizine de çözüm sunmaktadır.
Özellikler
Kit Özellikleri
Serum/plazma matrisinde serbest karnitin/açilkarnitinin 10 dk’da kantitatif analizi
Numune hazırlama için sadece birkaç pipetleme adımı; protein çöktür ve enjekte et
Yalnızca toplam karnitin tayini için basit bir hidroliz adımı
Kararlı izotop etiketli iç standart kullanımı
Düşük hacimli hasta numunesi
Uzun ömürlü HPLC analitik kolonu
Parametreler
Karnitin (serbest)-C0, Asetilkarnitin-C2, Propiyonilcarnitin-C3, Butirilkarnitin-C4,
İzovalerilkarnitin-C5, Hekzanoilkarnitin-C6, Oktanoilkarnitin-C8, Dekanoilkarnitin-C10,
Dodekanoilkarnitin-C12, Tetradekanoilkarnitin-C14, Hekzadecanoilkarnitin-C16,
Oktadekanoilkarnitin-C18 ve Oktadekenoilkarnitin-C18:1
Numune Türü
Serum/Plazma
Numune Hazırlama
Aşama 1
Serbest Karnitin/Açilkarnitin için Numune Hazırlığı
50 µL serum/plazma numunesi bir cam santrifüj tüpüne alınır
Aşama 2
Üzerine 25 µL iç standart solüsyonu eklenir ve 5 s vortekslenir
Aşama 3
Ardından 425 µL reaktif-1 (protein çöktürme) eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
Aşama 4
Süpernatant temiz bir HPLC vialine alınır ve sisteme enjekte edilir
Numune Hazırlama
Aşama 1
Toplam Karnitin/Açilkarnitin için Numune Hazırlığı
Bir ependorf tüp içerisine 50 µL of serum/plazma numunesi alınır
Aşama 2
50 µL reaktif-2 (hidroliz için) eklenir ve 5 s vortekslenir, ardından 65 oC’de 15 dk inkübe edilir.
Aşama 3
50 µL reaktif-3 eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
Aşama 4
50 µL hidrolizat bir cam santrifüj tüpüne alınır
Aşama 5
Üzerine 25 µL iç standart solüsyonu eklenir ve 5 s vortekslenir
Aşama 6
Ardından 425 µL reaktif-1 (protein çöktürme) eklenir, 5 s vortekslenir ve 4000 rpb’de 5 dk santrifüj edilir
Aşama 7
Süpernatant temiz bir HPLC vialine alınır ve sisteme enjekte edilir
Teknik Özellikler
Bileşik | Doğrusallık (R²) | Tekrarlanabilirlik (Günüçi LLQC %RSD) | Tekrarlanabilirlik (Günüçi HLQC %RSD) | Tekrarlanabilirlik (Günlerarası LLQC %RSD) | Tekrarlanabilirlik (Günlerarası HLQC %RSD) | Geri Kazanım (LLQC %) | Geri Kazanım (HLQC %) | LOQ (nmol/ml) |
---|
Karnitin (serbest) | 0,9998 | 2,83 | 1,02 | 2,75 | 2,01 | 99,70 | 90,79 | 0,057 |
Asetilkarnitin (C2) | 0,9998 | 0,99 | 0,94 | 1,04 | 0,98 | 93,33 | 109,84 | 0,057 |
Propiyonilkarnitin (C3) | 0,9999 | 1,32 | 0,94 | 1,33 | 1,18 | 109,89 | 104,97 | 0,017 |
İzo-/Butirilkarnitin (C4) | 0,9998 | 0,94 | 0,78 | 0,91 | 1,78 | 116,70 | 98,80 | 0,009 |
İzovaleri-/2-Metilbutirilkarnitin (C5) | 0,9998 | 0,95 | 0,71 | 0,76 | 0,93 | 111,70 | 97,90 | 0,009 |
Hekzanoylkarnitin (C6) | 0,9999 | 0,71 | 0,64 | 0,91 | 1,17 | 104,30 | 104,80 | 0,009 |
Oktanoilkarnitin (C8) | 0,9999 | 0,69 | 0,87 | 0,95 | 0,96 | 98,03 | 106,62 | 0,009 |
Dekanoilkarnitin (C10) | 0,9999 | 0,75 | 0,61 | 1,05 | 1,03 | 101,88 | 105,80 | 0,009 |
Dodekanoilkarnitin (C12) | 0,9999 | 0,89 | 0,85 | 0,84 | 0,94 | 103,90 | 104,10 | 0,009 |
Tetradekanoilkarnitin (C14) | 0,9999 | 0,78 | 0,88 | 0,88 | 0,94 | 104,00 | 102,90 | 0,009 |
Hekzadekanoilkarnitin (C16) | 0,9999 | 0,81 | 1,11 | 0,96 | 1,12 | 103,30 | 106,20 | 0,009 |
Oktadekanoilkarnitin (C18) | 0,9999 | 0,77 | 1,10 | 0,84 | 1,13 | 101,60 | 106,00 | 0,009 |
Oktadekanoilkarnitin (C18:1) | 0,9995 | 0,85 | 1,11 | 1,13 | 1,00 | 104,58 | 104,58 | 0,009 |
İlgili Ürünler
Genişletilmiş Yenidoğan Tarama LC-MS/MS Analiz Kiti
Yenidoğan taraması (NBS), bebeklerin doğumundan hemen sonra ortaya çık...
İdrarda Organik Asit GC-MS Analiz Kiti
Geniş bir bileşik sınıfını teşkil eden organik asitler; amino asit met...
Kolestanol, 7-Dehidrokolesterol GC-MS Analiz Kiti
Kolesterol biyosentezi ve diğer temel bileşiklere dönüşümü karmaşıktır...
Serumda Çok Uzun Zincirli Yağ Asitleri, Fitanik ve Pristanik Asit GC-MS Analiz Kiti
Peroksizomlar, küre şeklinde zarla çevrili organellerdir. Peroksizomla...
Lizozomal Depo Hastalıkları Taraması LC-MS/MS Analiz Kiti
Lizozomal enzimler, fazla şekerleri ve lipidleri hücrelerin kullanabil...
Serumda Steroid Hormon LC-MS/MS Analizi Kiti
Steroid hormonlar, düşük konsantrasyonlarda bile önemli vücut süreçler...
Serumda Organik Asit LC-MS/MS Analiz Kiti
Her organik asit bozukluğu (organik asidüri), kanda ve idrarda organik...
İdrarda Organik Asit LC-MS/MS Analiz Kiti
İnsan idrarı, organik asitler gibi çeşitli küçük polar metabolitlerden...
Kantitatif Amino Asit LC-MS/MS Analiz Kiti
Son yıllarda artan metabolomik çalışmalar, potansiyel hastalık tanı be...
PKU HPLC ANALİZ KİTİ
Fenilketonüri, aileden katılım yoluyla geçebilen bir hastalıktır. Bu h...
Teknoloji
Likit Kromatografi
HPLC (High Performance Liquid Chromatography) Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi kısaca HPLC olarak adlandırılır. Yüksek performans, yüksek resolüsyonu (ayrımı) ifade eder.
HPLC cihazı, analitik ayırma teknikleri amacı ile en yaygın ku...
Daha Fazla